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梯度基因扩增仪(HN-SP96G)工作原理

更新时间:2024-05-20浏览:139次

梯度基因扩增仪(HN-SP96G)扩增仪的工作原理:

梯度基因扩增仪(HN-SP96G)的工作原理主要基于聚合酶链式反应(PCR)技术,通过循环变性-退火-延伸三个基本步骤,实现DNA片段的体外扩增。具体过程如下:


  1. 变性:DNA双链在93℃左右的高温下解离成单链,以便与引物结合。

  2. 退火:温度降至55℃左右时,引物与DNA单链的互补序列配对结合。

  3. 延伸:在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。

通过不断循环这三个步骤(通常每完成一轮循环需2~4分钟),可以获得大量的DNA扩增产物。理论上,经过25~30轮循环后,基因可扩增10^9倍以上,实际上一般可达10^6~10^7倍。


基因测序仪的工作原理:

测序仪的工作原理主要基于特定的测序技术,如Sanger双脱氧链末端终止法。以下是其工作原理的简要概述:

  1. DNA片段制备:首先,需要将要测序的DNA片段进行特定的处理和准备。

  2. 测序反应:在测序反应中,利用特定的测序引物和DNA聚合酶,同时加入四种脱氧核苷酸(dATP、dTTP、dCTP、dGTP)和一种双脱氧核苷酸(ddNTP)。双脱氧核苷酸在合成中会随机终止DNA链的延伸,形成不同长度的DNA片段。

  3. 电泳分离:通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳对这些不同长度的DNA片段进行分离。

  4. 检测和读数:最后,通过特定的检测设备(如激光扫描仪)检测分离后的DNA片段,并根据片段的长度和顺序,读出DNA的序列。


需要注意的是,随着技术的进步,目前已经有更高效的测序技术,如高通量测序技术(也称为下一代测序技术),其工作原理可能有所不同,但基本原理仍然是通过检测DNA片段的序列来确定整个DNA分子的序列。

总的来说,扩增仪和测序仪都是生物实验室中重要的工具,它们在分子生物学、医学诊断、法医学鉴定、农业生物技术等领域有着广泛的应用。